副流感IgG1/2/3 ELISA試劑盒 ELISA操作孵育過程常見問題及解答
1） 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2） 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。 3）孵育溫度未按照說明書要求進(jìn)行，溫度過高或過低；
解決辦法：
1） 貼封片或加蓋；
2） 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間和孵育溫度 | 中文名稱 | 副流感IgG 1/2/3 ELISA試劑盒 | | 英文名稱 | Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA | | 產(chǎn)品貨號(hào) | RE56801 | | 產(chǎn)品規(guī)格 | 96T | | 檢測樣本 | 血清 | | 適應(yīng)物種 | 人 | | 預(yù)期用途 | 可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗體的體外定性和定量檢測。 | | 產(chǎn)品品牌 | 德國IBL | | 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
副流感1/2/3IgG檢測試劑盒預(yù)期用途
副流感1/2/3IgG elisa試劑盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗體的體外定性和定量檢測。
副流感1/2/3IgG檢測試劑盒檢測原理
副流感1/2/3IgG elisa試劑盒利用的夾心法原理。包被板上包被了抗原。用對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗來檢測結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后，所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線得。
副流感1/2/3IgG elisa試劑盒組成成分
| 4×2ml | 標(biāo)準(zhǔn)品A-D | 1；10；30；125U/mL，待用
標(biāo)準(zhǔn)品A=陰性質(zhì)控 標(biāo)準(zhǔn)品B=臨界質(zhì)控
標(biāo)準(zhǔn)品C=弱陽性質(zhì)控 標(biāo)準(zhǔn)品D=陽性質(zhì)控
內(nèi)含抗副流感病毒1/2/3的IgG抗體，PBS（磷酸緩沖液），穩(wěn)定劑。 | | 1×15ml | 酶標(biāo)IgG | 紅色，待用。內(nèi)含過氧酶標(biāo)記的抗人IgG，蛋白緩沖液，穩(wěn)定劑。 | | 1×12×8 | 包被板 | 可拆，包被有特異性抗原。 | | 1×15ml | TMB底物液 | 含TMB | | 1×15ml | TMB終止液 | 0.5M的H2SO4 | | 1×60ml | 稀釋液 | 含PBS緩沖液，＜0.1%NaN3 | | 1×60ml | 濃縮洗滌液 | 濃縮型（10×），含PBS緩沖液，吐溫20 | | 2× | 粘性金屬板 | 用于在溫育時(shí)遮蓋包被板 | | 1× | 塑料袋 | 用于儲(chǔ)存不用的板條 |
副流感1/2/3IgG檢測實(shí)驗(yàn)所需材料（試劑盒內(nèi)不提供）
★移液器，體積：5；50；100；500 µL
★校準(zhǔn)儀
★樣品稀釋用試管（1ml）
★帶試劑儲(chǔ)器8道移液器
★洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)
★能在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀
★雙蒸水或去離子水
★吸水紙，取樣吸頭和計(jì)時(shí)器
副流感1/2/3IgG elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
1、加100µL標(biāo)準(zhǔn)品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中，在定性檢測中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。
2、封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。
3、移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。
4、在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。
5、封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。
6、移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí)，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。
7、每孔加TMB底物液100µL。
8、室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘。
9、在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)包被板以使試劑混合均勻。此時(shí)，顏色藍(lán)色變成黃色。
10、加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測OD值。
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