人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒（ELISA）
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒產(chǎn)品詳細(xì) | 中文名稱 | 人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒 ELISA | | 英文名稱 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA | | 產(chǎn)品貨號 | 27812 | | 產(chǎn)品規(guī)格 | 96T | | 檢測樣本 | 人腦脊液 | | 適應(yīng)物種 | 人 | | 預(yù)期用途 | 用于檢測人腦脊液里磷酸化Tau蛋白定性檢測。 | | 產(chǎn)品品牌 | 日本IBL | | 供應(yīng)商家 | 深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司 |
人磷酸化Tau蛋白elisa試劑盒預(yù)期用途
人磷酸化Tau蛋白elisa試劑盒用于檢測人腦脊液里磷酸化Tau蛋白定性檢測，僅供科研用，不用于臨床診斷。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒成分
| 96T x 1 | 預(yù)包被板 | | 0.4mL x 1 | 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’） | | 0.5mL x 2 | 標(biāo)準(zhǔn)品:重組人Tau441 | | 30mL x 1 | EIA緩沖液 | | 12mL x 1 | 標(biāo)記抗體稀釋液 | | 15mL x 1 | 顯色劑 | | 12mL x 1 | 終止液 | | 50mL x 1 | 濃縮洗滌液 |
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒檢測原理
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒是固相夾心ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）。當(dāng)將*抗體包被在平板上時，將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入到板孔中進行*次反應(yīng)。 反應(yīng)后，加入HRP-綴合的二抗進入板孔進行第二次反應(yīng)。 沖洗掉未結(jié)合的二抗后，將四甲基聯(lián)本胺（TMB）加入孔中并顯色。
人磷酸化Tau蛋白檢測實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)
| ★ | 酶標(biāo)儀 | | ★ | 微移液管及其槍頭 | | ★ | 量筒及燒杯 | | ★ | 去離子水 | | ★ | 冰箱(4°C) | | ★ | 坐標(biāo)紙(log/log) | | ★ | 吸水紙 | | ★ | 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) | | ★ | 洗瓶 (用于洗板) | | ★ | 孵育器（37±1℃） | | ★ | 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑) |
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒儲存條件
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒在2-8℃保存，有效期見試劑盒外包裝。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒實驗步驟
使用前，將所有試劑應(yīng)平衡至室溫，大約30min，充分混勻，確保試劑質(zhì)量無改變，標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測必須同時進行.
1.確定樣本空白孔，并加入100ulEIA緩沖液。
2.確定樣本孔和標(biāo)準(zhǔn)品孔，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品（管1-7）100ul分別加入相應(yīng)的孔中
3.蓋板，*次孵育，
4.洗板，按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液，后在吸水紙上*拍干。
5.將每孔中加入100ul 準(zhǔn)備好的標(biāo)記抗體
6.蓋板，第二次孵育
7.洗板，按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液，后在吸水紙上*拍干。
8.取需要量的底物液到一次性檢測管中，每孔加入100ulTMB溶液。為了避免污染，檢測管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
9.黑暗中室溫孵育30min，顏色變藍(lán)。
10.每孔加入100ul 終止液終止反應(yīng)，通過點擊板的一面來混合板內(nèi)溶液，此時顏色變?yōu)辄S色。
11.讀取OD值：將板底污物清除，并保證板孔內(nèi)無氣泡，以空白孔為對照進行標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的測量。測量在450nm處進行，參考波長600-650nm，測量應(yīng)在終止液加入后30min內(nèi)進行。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒檢測步驟表格如下
| 試劑 | 待檢測樣品 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 樣品空白 | | 檢測樣品100ul | 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品（1-7管）100ul | EIA緩沖液 | | 蓋板，2-8°C下溫育過夜 | | 洗板4次（每孔加洗滌液不少于350ul，按操作注意事項中的8和9條進行 | | 酶標(biāo)抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | | 蓋板，2-8°C下溫育30min | | 洗板5次（每孔加洗滌液不少于350ul，按操作注意事項中的8和9條進行 | | 底物液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 室溫避光溫育30min | | 終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 加終止液后,30min內(nèi)于450nm/600-650nm處讀取OD值， |
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