TNF-α檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）已知TNF-α濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將TNF-α和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TNF-α的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料：
1、蒸餾水。
2、加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3、振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性：
1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2、實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項：
1、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7、底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
