小鼠抗IgG單克隆抗體的制備方法
小鼠抗IgG單克隆抗體在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中顯示了極大的應(yīng)用價值，是親和層析中重要的配體，是免疫組化中主要的抗體，是免疫檢驗中的新型試劑，是生物治療的導(dǎo)向武器。作為醫(yī)學(xué)檢驗試劑，可以充分發(fā)揮其優(yōu)勢。單克隆抗體的特異性強，可將抗原抗體反應(yīng)的特異性大大提高，減少了可能的交叉反應(yīng)，使試驗結(jié)果可信度更大。單克隆抗體的均一性和生物活性單一性使抗原抗體反應(yīng)結(jié)果便于質(zhì)量控制，利于標準化和規(guī)范化。
小鼠抗IgG單克隆抗體即單個B淋巴細胞克隆所分泌的抗體?？贵w主要由機體的B淋巴細胞合成，每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫，即克隆。如果選出一個合成一種抗體的細胞進行培養(yǎng)，就。單克隆抗體是單個B淋巴細胞克隆后產(chǎn)生的專門針對一種抗原決定簇的抗體單克隆抗體是單個B淋巴細胞克隆后產(chǎn)生的專門針對一種抗原決定簇的抗體單克隆細胞合成的針對一種抗原決定簇的抗體稱為單克隆抗體。小鼠抗IgG單克隆抗體可以檢測出多種病毒中非常細微的株間差異，鑒定細菌的種型和亞種。
小鼠抗IgG單克隆抗體的制備是以細胞融合并培養(yǎng)為原理進行的，它是一種抗體，是一種克隆化的細胞株，能夠穩(wěn)定的分泌特定的單克隆抗體?？寺∮卸喾N含義，克隆的定義1：一個共同前體通過無性繁殖而形成的一群基因結(jié)構(gòu)相同的細胞或個體。對于基因克隆，則指一個基因反復(fù)擴增后產(chǎn)生的多個拷貝。定義2：來自同一個祖先、經(jīng)過無性繁殖所產(chǎn)生相同的分子。
單克隆抗體制備有兩種方法：
一種方法是：增量培養(yǎng)法，即將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體。該法需用特殊的儀器設(shè)備，一般應(yīng)用無血清培養(yǎng)基，以利于單克隆抗體的濃縮和純化。
二也是普遍采用的方法是小鼠腹腔接種法。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠，先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射，一周后將雜交瘤細胞接種到小鼠。小鼠抗IgG單克隆抗體直接在體外培養(yǎng)都可以。
