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酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹
   酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹
  酶聯(lián)診斷試劑是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用較廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
  酶聯(lián)診斷試劑具有快速、敏感、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點,使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用 。盡管早期的試劑盒由于特異性不夠高而妨礙了其在實際中應(yīng)用的步伐,但隨著方法的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程方法制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆抗體進(jìn)行阻斷酶聯(lián)診斷試劑試驗,都大大提高了酶聯(lián)診斷試劑的特異性,加之電腦化程度*的檢測儀的使用,使酶聯(lián)診斷試劑更為簡便實用和標(biāo)準(zhǔn)化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測方法之一。
  酶聯(lián)診斷試劑靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。對于酶聯(lián)診斷試劑的洗滌主要有兩大方法,那今天酶聯(lián)診斷試劑廠家就給大家簡單講解下哦。
  一、浸泡式
  1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
  2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
  3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
  4.吸干孔內(nèi)液體,吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
  5.重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加酶聯(lián)診斷試劑洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
  二、流水沖洗式
  開始用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。酶聯(lián)診斷試劑洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
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